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內標法的的一些總結
內標法是結合了峰面積歸一法和外標法的優(yōu)點(diǎn)的一種方法，它在加入內標物后，按峰面積歸一法的分析方法進(jìn)行分析，這就避免了由于進(jìn)樣的一致性及樣品歧視效應導致的偶然誤差。因而，它的分析精密度也是比較高的，是一種比較理想的定量分析方法。它的弱點(diǎn)是前處理比較復雜，所花費的時(shí)間也比較長(cháng)，同時(shí)必須要有合適的標樣及內標物才能進(jìn)行內標法定量分析。
01內標法的優(yōu)缺點(diǎn)
內標法的優(yōu)點(diǎn)：
對進(jìn)樣量不嚴格要求，測定的結果也較為準確，由于通過(guò)測量?jì)葮宋锛氨粶y組分的峰面積的相對值來(lái)進(jìn)行計算的，因而在一定程度上消除了進(jìn)樣量、儀器不穩定等變化所引起的誤差，只對欲分析的組分峰做校正。
內標法的缺點(diǎn)
是必須加一個(gè)組分進(jìn)到樣品，易增加面積測量誤差。操作程序較為麻煩，每次分析時(shí)內標物和試樣都要準確稱(chēng)量，有時(shí)尋找合適的內標物也有困難。
02內標物的選擇原則
采用內標法定量時(shí)，內標物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說(shuō)，內標物應當是一個(gè)能得到純樣的已知化合物，這樣它能以準確、已知的量加到樣品中去，它應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì)(如化學(xué)結構、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應特征，最好是被分析物質(zhì)的一個(gè)同系物。
當然，在色譜分析條件下，內標物必須能與樣品中各組分充分分離。需要指出的是，在少數情況下，分析人員可能比較關(guān)心化合物在一個(gè)復雜過(guò)程中所得到的回收率，此時(shí)，他可以使用一種在這種過(guò)程中很容易被完全回收的化合物作內標，來(lái)測定感興趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說(shuō)的選擇原則。
對于內標法定量分析來(lái)說(shuō)，內標物的選擇必須滿(mǎn)足如下的條件：
1、內標物與被分析物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)要相似（如：沸點(diǎn)、極性、化學(xué)結構等）；
2、內標物應是該試樣中不存在的純物質(zhì)；
3、它必須完全溶于被測樣品（或溶劑）中，且不與被測樣品起化學(xué)反應；并與試樣中各組分的色譜峰能完全分離；
4、能加入內標物的量應接近于被測組分；
5、色譜峰的位置應與被測組分的色譜峰的位置相近，或在幾個(gè)被測組分色譜峰中間。且又不共溢出，目的是為了避免儀器的不穩定性所造成的靈敏度的差異；
6、選擇合適的內標物加入量，使得內標物和被分析物質(zhì)二者峰面積的匹配性大于75%，以免由于它們處在不同響應值區域而導致的靈敏度偏差。
需要指出的是，在少數情況下，分析人員可能比較關(guān)心化臺物在一個(gè)復雜過(guò)程中所得到的回收率，此時(shí)，可以使用在這過(guò)程中很容易被完全回收的化臺物作內標，來(lái)測定感興趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說(shuō)的選擇原則。
03內標法操作
將已知量的內標樣加入標準樣品，制成混合標樣，并配制一系列的已知濃度的工作標樣。混合標樣中標樣與內標樣的摩爾比不變。
注入色譜柱，以（標樣峰面積/內標樣峰面積）為響應值。
根據響應值與工作標樣濃度之間存在的線(xiàn)性關(guān)系，即W=f×A，制成標準曲線(xiàn)。
將已知量的內標樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測組分的響應值。
根據已知的系數f，即可求出欲測組分的濃度。
內標法的特點(diǎn)：
操作過(guò)程中樣品和內標是混合在一起注入色譜柱的，因此只要混合溶液中被測組分與內標的量的比值恒定，上樣體積的變化不會(huì )影響影響定量結果。
內標法抵消了上樣體積，乃至流動(dòng)相、檢測器的影響，因此比外標法精確。
04制作內標標準曲線(xiàn)
在用內標法做色譜定量分析時(shí)，先配制一定重量比的被測組分和內標樣品的混合物做色譜分析，測量峰面積，做重量比和面積比的關(guān)系曲線(xiàn)，此曲線(xiàn)即為標準曲線(xiàn)。
在實(shí)際樣品分析時(shí)所采用的色譜條件應盡可能與制作標準曲線(xiàn)時(shí)所用的條件一致，因此，在制作標準曲線(xiàn)時(shí)，不僅要注明色譜條件(如固定相、柱溫、載氣流速等)，還應注明進(jìn)樣體積和內標物濃度。
在制作內標標準曲線(xiàn)時(shí)，各點(diǎn)并不完全落在直線(xiàn)上，此時(shí)應求出面積比和重量比的比值與其平均位的標準偏差，在使用過(guò)程中應定期進(jìn)行單點(diǎn)校正，若所得值與平均值的偏差小于2，曲線(xiàn)仍可使用，若大于2，則應重作曲線(xiàn)，如果曲線(xiàn)在鉸短時(shí)期內即產(chǎn)生變動(dòng)，則不宜使用內標法定量。
05小結
內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時(shí)，加入一種內標物質(zhì)以校準和消除出于操作條件的波動(dòng)而對分析結果產(chǎn)生的影響，以提高分析結果的準確度。